蝉花发酵产物抑菌活性研究
摘要:蝉花是一种虫草属真菌,具有较高食用、营养和药用价值,被认为是冬虫夏草最佳替代珍贵菌类。近年来,蝉花抑菌活性研究受到广泛关注。为此,本文就蝉花发酵产物中抑菌活性物质分离纯化方法及发酵产物性能进行研究。本论文研究结果为生产提供高效和稳定性好的蝉花活性物质提供理论依据。
关键词:蝉花真菌; 发酵产物; 分离纯化; 抑菌活性
一、文献综述
引言
蝉花(Cordyceps cicadae)为麦角菌科(Claviceplaceae)蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae (Mique1)Samson)寄生在蝉类若虫上的子座及若虫尸体的复合体,是我国传统中药材之一。冬虫夏草、大团囊虫草Cordy ceps ophiogloissoides ( Ehr. ex Fr. ) Link、蛹虫草C. militaris ( L. ) Link、古尼虫草 C. gunnii ( Berk. ) Berk.、蝉花等是我国常见的药用真菌。目前对前4种虫草研究较多,而对蝉花真菌研究相对较少[1]。而蝉花是一种与冬虫夏草齐名的珍贵药材,具有多种药用价值,但关于蝉花真菌抑菌活性物质的研究相对较少。党向利[2]等以蝉拟青霉022007-9菌株为研究对象,优化了蝉拟青霉的发酵培养条件,利用过滤、离心、脱糖、盐析和凝胶柱层析等手段,从其代谢产物中分离得到了对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有良好抗菌作用的活性组分G1,初步表明其为小分子肽类物质。
蝉花发酵产物有多种活性物质,如核苷类物质、多球壳菌素、麦角固醇及其过氧化物、生物碱、虫草酸、透明质酸及大分子多糖和多种必需氨基酸、微量元素等[3-4]。虫草素是一类核苷类抗生素,具有抗菌、抗病毒、干扰RNA和DNA合成,显著抑制多种肿瘤生长等功效[5-6]。已有研究证明蝉拟青霉多糖具有抗氧化、增强免疫功能、抗肿瘤、抗病毒等作用[7-9]。近年来,研究者在研究蝉花真菌多糖抑菌活性,但抑菌活性相对较差[10]。多球壳菌素为长脂链alpha;shy;氨基酸,具有抗菌活性和免疫抑制作用,由于它是鞘脂类生物合成的关键催化酶丝氨酸棕榈酰转移酶抑制剂,已被开发成抗动脉粥样硬化药[11]。此外,蝉花真菌活性物质还包括几丁质酶、蛋白酶、酯酶、淀粉酶等降解酶酶类,这些酶类可以作为真菌杀虫剂[12-13]。目前虫草类真菌的生产大都通过固体或液体培养获得,某些活性成分甚至超过了原有天然菌类,此法不仅可以克服化学合成中可能存在的高成本及对环境污染问题,也可以避免人工栽培过程周期长、易受气候、土壤和病虫害等的影响[14]。为了对有限的野生蝉花资源更好开发利用,我们利用深层发酵技术获得高含量蝉花有效成分,分离纯化蝉花活性物质。为此,本文首先分离纯化蝉花发酵产物抑菌物质,研究其抑菌活性,并对抑菌活性物质进行稳定性研究。
1 蝉花发酵活性物质及其药理作用
1.1 活性物质
蝉花发酵产物有多种活性物质,如核苷类物质、多球壳菌素、麦角固醇及其过氧化物、生物碱、虫草酸、透明质酸及大分子多糖和多种必需氨基酸、微量元素等[3-4,14]。研究表明:蝉花中所含的氨基酸、多糖、甘露醇等活性成分均与冬虫夏草相近,且重金属 As,Hg,Pb的含量均比冬虫夏草低,其中 Hg在蝉花中未检出,说明蝉花比冬虫夏草更具安全可靠性,因此蝉花很有可能作为冬虫夏草替代品[1]。
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