解脲支原体临床株的分型研究文献综述

 2022-12-04 16:00:16

研究背景：

解脲支原体感染引起的非淋菌性尿道炎的比例日益升高，而且解脲支原体是人类泌尿生殖道常见的携带微生物【1】。解脲支原体是人类泌尿生殖道内最常见的支原体，且女性患者检出率更高【2】。已证实解脲支原体可导致生殖器官的急慢性炎症、不孕不育、异位妊娠、流产等相关系统疾病【3】。几十年来，解脲支原体的研究不断深入，人们对解脲支原体的认识也经历着不断深入和更新的过程。

根据分子生物特性不同，解脲支原体主要包括两个生物群、14个血清型。其中，生物一群包括1.、3、6、14型，生物二群包括其余的十个血清型。对于基因型，生物一群包括基因型1（对应血清型1）、基因型3（对应血清型3和14）以及基因型6（对应血清型6）。生物二群则包括基因型4（对应血清型4、7、10、11、12、13）和基因型8（对应血清型2、5、8、9）【3】。当对解脲支原体做临床试验的时候，发现解脲支原体血清型2耐药性最强，其次为血清型9。这两种血清型由于其耐药性强，故而相对感染性更强【4】。

通过临床采集下生殖道解脲支原体菌株，在实验室进行选择培养，采用解脲支原体选择性液体培养基进行培养【5】。备选四种方法对支原体临床株进行分型，分别是巢式PCR技术、实时荧光定量PCR技术、CAPs、脉冲场凝胶电泳。巢式PCR技术有助于剔除错误片段，从而保证PCR反应中降低错误率；实时荧光定量PCR技术对实验条件要求低，易操作；CAPs是PCR技术的有力补充，但是成本高，不易大面积应用；脉冲场凝胶电泳则主要用于分离大分子DNA片段，不适合于检测。对比四种方法，最后采用实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR），即通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

实验目的：

1.区分临床采集解脲支原体的血清型；

2.为研究该临床株解脲支原体致病性提供理论依据。

实验方法：

1.DNA 提取及引物设计

（1.Uu的培养：将Uu菌株放于支原体选择液体培养基培养，设置阴性对照，37°C下培养一周左右，每日观察液体颜色变化。阳性培养基在4d左右出现颜色变化，而阴性培养基无颜色变化【6】。

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