响应面法银杏叶总黄酮复合酶预处理工艺的研究
摘要：综述了近年来对黄酮类化合物提取分离方法的研究进展，黄酮的提取方法有水提法、微波提取法、有机溶剂提取法、超临界萃取法、酶辅助提取法、超声波辅助提取法等。对其中的酶辅助提取法做主要的研究。黄酮类有包括抗突变、抗肿瘤、治疗心血管疾病等广泛生物学活性,还有减少自由基形成和清除自由基的抗氧化活性。黄酮类化合物还是重要的抗氧化剂，对黄酮类化合物的提取和预处理进行研究，为我们开发利用黄酮类化合物提供了科学的依据。
关键词：黄酮;复合酶;提取;响应面法
一、文献综述
我国银杏叶的资源十分丰富，银杏叶中富含着总黄酮等成分，银杏叶的总黄酮具有调血脂、扩张冠脉、降低血管脆性、止血、祛痰、止咳等活性，其中许多有着清除皮肤中自由基、促进皮肤的新陈代谢、减少色素沉着和润泽肌肤等的作用。植物类黄酮作为护肤因子在抗皮肤过氧化与延缓衰老、美白、抗辐射、防晒、抗炎、抗过敏和抑菌等化妆品领域有着很光明的前景。现在普遍对于银杏叶总黄酮复合酶预处理工艺的研究采用响应面法优化设计实验报道较少，分析响应面法及其等高线，以此来求得最佳工艺参数，响应面法是一种采用多元二次回归方程来拟合响应值与因素之间函数关系的优化统计方法，响应面法与过去推广的“正交设计法”不同，克服了正交试验只能对一个孤立的试验点进行分析和不能给出直观图形的缺陷，越来越多的食品行业工作者采用了响应面法。本实验为了在单因素试验的基础上，利用响应面法来对银杏叶总黄酮复合酶预处理工艺进行优化，从而求得银杏叶总黄酮复合酶预处理法的最佳工艺条件。
银杏叶在植物学上是银杏科银杏属落叶乔木，一般在秋天银杏叶还没变黄时采收，然后进行干燥保存备用。银杏叶多为人工进行栽培，在全国各地都有种植的地区，南北都可生长培育。银杏叶的味道较为苦涩、有甘味、有轻微的毒性。银杏叶的功效有很多，可以去除湿气，治疗腹泻、咳嗽哮喘，治疗胸闷头痛等疾病。黄酮类、维生素还有氨基酸等一些活性成分在银杏叶中也有很多含量。通过药理性的研究表明，黄酮类和萜内酯类的化合物是银杏叶中的主要生物活性成分。[7]
黄酮类化合物广泛存在于自然界的植物中，属植物次生代谢产物，根据其结构特点，可将黄酮类化合物分类为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查尔酮、黄烷醇、花色素、双黄酮等。
目前，银杏叶总黄酮的提取工艺主要有传统的水提取、有机溶剂提取和新技术辅助提取法，如微波辅助提取、超声波辅助提取、闪式提取、超临界流体萃取、酶辅助提取等提取技术。其中，酶法提取技术近年来受到关注，与传统提取方法相比，酶制剂能有效地破坏植物细胞壁的纤维组织，破坏细胞壁完整性，加快植物中的成分溶出，提高生产效率。为银杏叶总黄酮的提取工艺改进提供科学依据。黄酮类化合物的生物活性引起了人们的广泛重视，对该类化合物的研究已成为国内外食品、医药界研究的热门课题，是一类具有广泛开发前景的天然活性成分。[1]
黄酮化合物提取方法
1.1 水提取法
现在在我国国内，主要是采用水提法来对银杏叶中的黄酮苷类进行提取。水提法的优点在于该方法所需要的设备较为简单，所需要的经济成本也较低。较不污染环境，也不会破坏空气质量，对人的身体健康也无危害。黄酮化合物包括游离的黄酮苷元成分和黄酮苷类成分，其中，黄酮苷类具有一定水溶性，尤其是在热水中溶解度会很大程度的增加。水提取法所需要的成本比较低，安全性也高，所以非常适合工业行业的规模化生产。蒋华梅等在前人实验的基础上，采用正交实验法首次对黔产银杏叶水法提取总黄酮的最佳提取条件进行了系统的筛选，对工业生产可起到有效的指导作用，可促进黔产银杏叶的开发利用，发展地方经济。[2]
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