开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一．课题背景
荷叶为睡莲科植物莲的叶，属药、食两用植物。荷叶中含有多种生物活性物质，如荷叶碱、亚美罂粟碱、N-去甲基荷叶碱等多种生物碱和丰富的莲、槲皮素及异槲皮素等黄酮类化合物，有较好的降脂、减肥、降血压和防止动脉粥样硬化等药、食疗功效。此外，荷叶中的碱性成分以及黄酮挥发油、皂类、甾体等成分还具有一定的抑菌活性。因此，荷叶具有很好的开发利用价值[[1]][[2]][[3]]。李志诚[[4]]等人用化学方法和光谱方法首次分离鉴定出11种荷叶化学成分，主要为正二十八烷、正十八烷酸、苯甲酸、邻轻基苯甲酸、没食子酸、R一谷街醇、胡萝卜贰、槲皮素、荷叶碱、2-羟基-1-甲氧基阿朴啡、杏黄婴粟碱。刘密新[[5]]等人用色谱-质谱法研究了荷叶中的生物碱，共分离鉴定出四种生物碱：荷叶碱、N-降解荷叶碱、降荷叶碱、绕袂碱；同时，采用色谱法、色谱-质谱法对荷叶精油成分进行了分离鉴定，共鉴定出48种精油成分，主要是一些醇、酸、醛、酮、醋、酚、烷和烯等。杜力军[[6]]等以急性高脂血症小鼠为整体模型观察荷叶水提物对血清总胆固醇及甘油三酯的影响，体外给药观察药物对肝细胞合成胆固醇的影响，结果表明荷叶生物碱及黄酮均有调脂作用，小剂量荷叶黄酮对体外肝细胞合成胆固醇有抑制趋势。陈海光[[7]]等人确定了荷叶中功能成分黄酮类化合物和生物碱较佳的水提取工艺：以30倍的水，于80～90℃提取1．5h，提取液成酸性。
二．要解决的问题
本课题采用优化试验设计方法和非线性优化技术，从荷叶的利用率角度出发，研究影响荷叶功能性成分提取效果的主要工艺参数的优化组合，为荷叶的综合利用开发提供依据[[8]]，并对荷叶醇提物的抗氧化功能与降血糖活性进行探究。
三．研究方法与内容
本实验以乙醇溶液为溶剂，从荷叶中提取有效成分，此方法操作简便，可除去杂质，提取液不易腐败变质，回收后乙醇可再次使用。对荷叶乙醇提取物进行定性研究，加入黄酮类物质显色试剂时出现明显显色反应，而加入生物碱沉淀试剂后未出现明显沉淀，可推断荷叶醇提物中的主要的功能性成分为黄酮类物质[[9]]。
黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态(苷元)的形式存在[[10]]。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。黄酮类化合物的溶解性因其结构不同而有很大差别，据此可进行提取精制[[11]]。荷叶中的黄酮类化合物主要有荷叶苷、槲皮素等，主要以苷类的形式存在。黄酮类化合物的苷类一般难溶于乙醚、氯仿和苯等非极性溶剂，而易溶于甲醇，乙醇、乙酸乙酯、水(热水)等极性溶剂[[12]]。本实验采用标准曲线法，利用芦丁标准品绘制标准曲线。芦丁结构中含有酚羟基和环酮基结构，可与某些金属盐试剂生成有色络合物，在510nm波长处有吸收，可用可见光分光光度计测其含量。本实验热乙醇浸提黄酮后,趁热过滤并定容,采用NaNO2-Al(N03)3-NaOH法进行黄酮含量的测定，于510nm波长处测定吸光度，参照标准曲线得到黄酮含量[[13]][[14]][[15]]。
本实验设置单因素实验（时间、温度、溶剂浓度、物料比、pH）并进行正交试验，通过比较各浸提条件下的浸提率来探究乙醇浸提法提取荷叶醇提物的最佳工艺参数。
DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获(“清除”)其他的自由基。因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以520nm 为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。DPPH在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其醇溶液呈紫色，且需低温避光储藏，具有单一电子，故能接受一个电子或氢离子，在波长为517nm下具有最大吸收[[16]]。有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被捕捉而使其颜色变浅，在最大光吸收波长处的吸光值下降，且下降程度呈线性关系，吸光度水平的降低表明抗氧化性的增加，从而以评价试验样品的抗氧化能力。此抗氧化能力用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化性越强。本实验以蒸馏水作为空白对照，抗坏血酸作为阳性对照，使提取液与DDPH溶液反应,于517m波长处测定吸光度，测定荷叶醇提物的DPPH 自由基清除率，以证明其是否具有具有较强的降低羟基自由基、烷基自由基或过氧化自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用[[17]]。
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