一）拟研究或解决的问题
本项设计目的在于研究裂解酶的活性,酶活性测定的新技术方法可以为生命科学的研究起到推动以及促进作用。裂解酶参与人体的代谢过程并起到不可忽视的作用，其活性会影响到集体各方功能，研究其活性，可以为某些疾病发生、发展机理的阐明和治疗提供理论根据。研究酶活型的方法有很多,但都存在一定的缺点,存在一种方法往往只能测定一种或者近似的一类酶的活型，通用性不强，成本代价过高，测定结果存在一定的偏差等问题。发展高效和高灵敏度分析鉴定新方法已成为研究裂解酶活性过程中亟待解决的关键科学问题之一。本课题在于通过微纳流控芯片技术的特殊通过效应、高效、精确、便捷地测出酶浓度，只要找到相应的肽链，通过特定手法就可测定出相应裂解酶活型，通用性强，此法为裂解酶活性研究提供了新思路，开拓了新领域。
（二）采用手段
实验分几个部分：微纳流控芯片的构建、用FITC标记的蛋白或肽连与金纳米粒子相连使荧光猝灭、trypsin酶与前者反应太链断开、FITC标记的短肽链可以通过微纳流控通道而金纳米粒子无法通过，通过的荧光标记肽链可以被检测器检测，从而测定酶活性。
微纳流控芯片是在微流控技术的基础上，引入纳米通道，构建微纳流控芯片。这一技术是近几十年在分析化学领域发展起来的，它是生命科学、化学、微机械和微电子学等几个学科的综合以及研究热点,主要用于生命科学的研究。它具有高效、快速、试样用量少、节约药品等优点,为我们的试验带来了极大方便。本实验首先需要构建微纳流控芯片,利用其电荷以及尺寸效应,有效拦截生物大分子,使得中性小分子得以通过,以便下面的检测。
金纳米粒子的制备也是实验的关键步骤，纳米粒子的粒径直接影响实验结果，所以要好好把握。
（三）文献综述
题名：微纳流控芯片上裂解酶活性的研究
著者：张津瑗 指导老师：王琛
摘要：裂解酶是人体代谢过程中一类重要的酶，其活性与人体各项机能的发挥以及疾病的防治息息相关，因此，寻找通用、高效、便捷的活性测定法将为生命科学领域带来推动性发展。现存裂解酶活性测定法中往往存在这样或那样的问题，所以著者拟进行一项课题设计，此设计将要在微纳流控芯片上测定酶的活型，通过构建微纳流控芯片以，荧光标记的肽链或者蛋白质与金纳米粒子相连实现猝灭，再用相应裂解酶裂解肽链，荧光标记分子粒径较小可以通过纳米通道，而金胶无法通过，通过的荧光标记分子可以被检测器检测，通过荧光分子的量间接得出酶的活型。此法简单易行，微量高效，通用性强，研究一旦达成，将为裂解酶活性研究领域带来推动性发展。
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