“ZH002项目细胞培养放大过程研究”开题报告
研究目的
动物细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已成为医药生物高技术产业的重要部分[1]。研究公司ZH002项目细胞逐步放大过程理论和实践，从种子复苏一直到2000L规模培养的过程考虑和放大原理。通过阐明原理，找到放大关键控制参数，放大标准。找到合适的方法进行ZH002项目细胞培养放大，达到生产目的。
文献综述
经过几十年的研究与实践应用，动物细胞培养技术已日趋完善，发展方向将集中在改进细胞特性优化细胞环境，扩大生产规模和提高目的产物与产量等几方面。[2]目前得到了动物细胞基因工程技术和杂交瘤技术、新型细胞培养反应器及其监测调控技术、无血清培养技术、新型微载体研制及微囊化技术等研究成果。[3]然而目前为止还有很多问题没有得到很好的解决，比如哺乳动物细胞表达系统的表达水平仍然偏低[4]、细胞群体长时期培养过程活性降低仍然棘手培养设备依旧昂贵、对细胞代谢和生长动力学的研究以及在线监测水平还远不足以设计出确定的优化培养系统，导致浪费。[5]
正文
细胞培养根据细胞种类分类可分为原代细胞培养和传代细胞培养[6]。
原代细胞：将动物各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理，分散成单细胞，在合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞，一般培养10代后不再增殖，死亡[7]。
传代细胞：传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长，这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细地无菌操作。培养的细胞为癌变或人为癌化的细胞，理论上可以无限增殖[8]。癌化的方式有很多：进行癌基因突变，感染病毒，从癌症供体体内分离，物理或化学方法（如紫外，化学试剂）等[9]。
而根据培养方式可分为贴壁细胞培养，半悬浮细胞培养，悬浮细胞培养[10]。
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