开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、课题解决的问题
绞股蓝为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物,主要药效成分为绞股蓝皂苷,因其中有与人参皂苷相同的成分而备受瞩目 ,成为近年来研究的热点之一。绞股蓝皂苷有各种药理作用,如抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂、抗血栓、保肝以及增强免疫力等作用。目前绞股蓝皂苷的提取分离工艺还不是特别完善,而且绞股蓝含量测定方法多采用紫外分光光度法、重量法、比色法等进行质量评估,由于多种干扰因素的影响会导致实验数据的精确度降低,这对绞股蓝总皂苷质量控制造成一定程度的影响,因此需要一种方法为质量控制评价提供科学依据。
二、采用的研究手段
根据绞股蓝皂苷相似相容的原理,用乙醇回流提取绞股蓝药材中的皂苷得到总皂苷粗品,在经过大孔树脂柱进行纯化得到绞股蓝皂苷提取物。取标准物及绞股蓝皂苷提取物用HPLC法进行测定,用标准曲线法或外标一点法进行计算。
三、文献综述
绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino)为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物,有“南方人参”和“第二人参”的美誉,别名小苦药、公罗锅底、五叶藤、遍地生根等,日本因其有甜味称为甘茶蔓。绞股蓝是一种非常重要的中草药,其早在明清《救荒本草》、《农政全书》、《植物名实图考》中就有记载,近年来日益受到重视并得到广泛及深入的研究。绞股蓝主要药效成分为绞股蓝皂苷(Gypenoside,Gyp),因其中有与人参皂苷(Ginsenoside,Gin)相同的成分而备受瞩目,成为近年来研究的热点之一。本文主要综述了绞股蓝皂苷提取物的质量研究[1]。
绞股蓝中主要含达玛烷型皂苷,迄今已从绞股蓝植物中分离鉴定了200余个结构明确的Gyp,根据侧链双键的位置、双键个数以及侧链成环类型的不同,可分为17类[2]。所有Gyp的苷元部分都为达玛烷型四环三萜类,其中有一部分分别为人参皂苷Rb1、Rb3、Rd,以及人参二醇、2alpha;-羟基人参二醇,2alpha;,19-二羟基-12-脱氧人参二醇等。因此,其成分的含量测定和成品标准,也常以人参皂苷Rb1的多少作为标准。研究显示,Gyp具有多种药用价值,如抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂、抗血栓、保肝以及增强免疫力等作用[3]。
人参皂苷Rb1具有营养神经、保护心肌、改善记忆力、抗衰老、抗氧化、保肝等作用[4]。在前期研究中发现,绞股蓝和其热处理产物均具有浓度依赖性抑制非小细胞肺癌A549细胞活性[5]随后,刘慧敏等人[6]发现绞股蓝皂苷gypenosideXLVI和gypenosideLVI,它们均为达玛烷型四环三萜皂苷,它们均具有抑制A549细胞增殖作用,能够有效抑制肺癌。朴香兰发现绞股蓝L、LI均可用于制备治疗肝癌肺癌等肿瘤的药物[7]。
研究发现,在达玛烷骨架C20位有游离羟基的绞股蓝皂苷Gyp-XXIII、Gyp-XXIV、Gyp-XXV、Gyp-XXVII、Gyp-XXVIII、Gyp-XXIX和C21位有游离羟基的绞股蓝皂苷Gyp-XXII、Gyp-XXVI对肝癌、肺癌等多种癌细胞的增殖有明显抑制作用,但对正常细胞无任何影响。Gyp-L能通过引起蛋白质的泛素化和内质网应激反应,导致二磷酸肌醇受体Ca2+释放,最终导致人食管癌细胞、人肝细胞癌细胞死亡。绞股蓝皂苷通过其抗氧化和抗凋亡的生物活性,有效地防止了局部缺血/再灌注诱导的肝损伤、CCl4诱导的肝纤维化。通过使用绞股蓝总皂苷,抑制2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病的大鼠血清中的血清瘦素水平的上升和脂联素水平的下降,抑制脂肪肝和肝纤维化。同时,绞股蓝皂苷通过调节肝脂肪生成过程中参与脂肪酸氧化的关键转录因子和脂肪生成酶,辅助治疗非酒精性脂肪性肝病,从而提高总体预后。其中,抑制线粒体通路介导的肝细胞凋亡是绞股蓝总皂苷抗肝纤维化的重要机制之一,所以具有肝损伤保护作用。有研究表明,绞股蓝总皂苷对Lewis肺癌细胞的生长及肺转移均有抑制作用[8-13]
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