一、课题解决的问题
丹参(Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma.)是中医常用大品种中药之一。现代研究表明其主要活性化学成分之一的丹酚酸对心血管疾病有良好的疗效,具有较高的应用价值。利用基因工程、细胞工程等现代生物技术手段可对丹参进行改良以提高其药材有效成分的含量,挖掘筛选调控丹酚酸生物合成的关键因子,有助于实现丹酚酸生物合成的人工调控,提高丹参药材品质、满足市场需求。
二、研究方法
1.丹参细胞核的分离纯化:
从植物细胞中分离细胞核大致分为两步,第一步组织破碎、细胞裂解,第二步蔗糖垫子等密度梯度离心,第三步匀浆液对细胞核进行清洗
2.细胞核的纯度检测
从两方面进行,用光学显微镜或电子荧光显微镜进行形态观察和生物化学方法进行酶活力的测定
3.细胞核蛋白质的提取
细胞核蛋白提取液从分离纯化得到的细胞核中提取核蛋白
4.转录因子的鉴定
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