25R-鲁斯可皂苷元对脂多糖诱导急性肺损伤的作用研究文献综述

 2023-01-11 16:17:44

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

拟研究的问题: 鲁斯可皂苷元( Ruscogenin,RUS ),又名假叶树苷元,是麦冬中的主要皂苷元和有效成分之一。具有显著的抗炎、降低毛细血管通透性、调节前列腺功能失调、抑制 G 菌和抗弹性蛋白酶等作用。天然来源的鲁斯可皂苷元多是25 R、25 S 2个差向异构体混合物。课题组前期开展了关于鲁斯可皂苷优势构象的研究, 发现25 S-构型的鲁斯可皂苷元对 LPS 诱导的 ALI 没有改善作用,甚至有少量毒性;而25 R-构型的鲁斯可皂苷元对 LPS 诱导的 ALI 有改善作用,能减轻肺微血管内皮的损伤。本课题拟考察25 R-鲁斯可皂苷元对脂多糖诱导急性肺损伤的作用及量效关系,并初步探讨可能的作用机制,为未来鲁斯可皂苷元的合理用药提供一定的药理学依据。

采用的研究手段:本实验拟采用灌胃给药,1 h 后气管滴注 LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后处死小鼠,测定相关指标。主要考察肺湿干重比,肺泡灌洗液中蛋白含量和细胞数,病理切片等指标。

  1. 、肺湿干重比

灌胃给药,1 h 后气管滴注 LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后处死小鼠,取肺部组织,测定肺湿干比重,以测定各给药组、模型组与空白组的肺部含水量,从而评价药物对肺部水肿的改善情况。

  1. 、肺泡灌洗液中蛋白含量和细胞数

灌胃给药,1 h 后气管滴注 LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后腹腔注射4%水合氯醛来麻醉小鼠。用生理盐水对小鼠肺泡进行灌洗,回收灌洗液, BCA 蛋白定量法测定小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量,并用血球计数板在显微镜下进行细胞计数,以考察各给药组、模型组与空白组的肺血管通透性,从而评价药物对肺部血管通透性的影响。

  1. 、病理切片

灌胃给药,1 h 后气管滴注 LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后处死小鼠,取肺部组织 ,用10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片,再进行 HE 染色后,显微镜观察肺组织病变情况。

  1. 、 MPO 含量

灌胃给药,1 h 后气管滴注 LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后处死小鼠,取肺组织及肺泡灌洗液,测定肺组织匀浆液及肺泡灌洗液中的 MPO 含量,以考察各给药组、模型组与空白组肺组织中中性粒细胞粘附迁移的情况,从而评价药物对肺部炎症反应的影响。

  1. 、蛋白印迹法测定肺组织中 TLR4、TF、VE-cardhrein 等蛋白含量

灌胃给药,1 h 后气管滴注LPS 复制 ALI 小鼠模型,6 h 后处死小鼠,研磨肺组织,离心组织匀浆以提取蛋白,通过 western blot 技术考察肺组织中 TLR4、TF、VE-cardhrein 等蛋白的表达情况。

(六)、实习期间详细记录实验数据,撰写毕业论文,为今后发表SCI文章积累数据。

文献综述:

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