开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
葛根素降血压作用的内皮机制研究
一研究目的
高血压病，是人类心脑血管疾病中发病率最高的一种疾病，1990年世界卫生组织国际高血压学会规定未应用降压药者的血压持续ge;140/90mmHg即可诊断为高血压。现在一方面人们的生活水平有了提高，另一方面随着生活节奏加快和生活压力增加，高血压的患病率逐年上升。由资料显示，全球高血压患病人数己迂6亿，而我国的发病率也在逐年增高，目前在我国高血压患者已达2亿，并有继续增加的趋势。高血压除了本身会危害人的健康外，还会引起一系列严重的并发症，如冠心病、糖尿病等，危害人的生命。
高血压的发病机制目前尚未完全清楚，对于高血压发病机制和抗高血压药物的研究一直是医药界的重点课题。
本实验以血管内皮细胞ECV-304为重点对象，研究高血压的发病机理。血管内皮细胞损伤及一些药物对其的保护机理已成为研究心血管疾病的热点，目前的研究前沿是细胞信号转导途径和与该信号途径中相关功能蛋白质的分离与鉴定。
在药物治疗中，中药治疗在改善高血压病临床症状方面具有独特的优势。葛根是治疗高血压疾病的一种优良中药，其中，葛根素(Puerarin)是中药葛根的主要有效成分之一[1]。药效学和临床方面大量的研究工作表明：葛根素具有良好的降血压功效；但对其作用机制的研究仍然不够深入，同时对其药理学的研究也缺乏利用现代技术手段，这些问题阻碍了葛根素中药现代化的进程，这也是大多数中药现代化遇到的困难。
据报道，葛根素影响自发性高血压大鼠降血压机制的研究中,发现给药葛根素四周后，葛根素可显著上调肾脏、肝脏和血管中一氧化氮合酶的含量 [2]，这说明葛根素的降血压机制与它对一氧化氮合酶的合成有一定的相关性，本实验将对此展开一系列研究。
本实验中，用不同浓度葛根素溶液作用于ECV-304细胞，研究葛根素降是否影响了细胞内某些蛋白的表达，通过一系列的生物化学分子机制来达到降低血压的目的。即人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）结合小凹蛋白（CAV-1）使eNOS的活性发生变化，从而影响一氧化氮的产生，影响血压的变化这一信号通路，为治疗高血压提供新思路。
二研究的原理及其背景
人脐静脉内皮细胞是一种血管内皮细胞(Vascular endothelial cell, VEC)，由于内皮细胞分泌多种生物活性物质，这些生物活性物质参与了血液系统、心血管系统甚至免疫系统等的功能调节[3]。内皮细胞结构与功能的损伤是高血压的重要启动因素之一[4]，尤其是内皮细胞合成，分泌和调节的内皮细胞舒张因子一氧化氮( nitrogen oxide，NO)[5]是我们本次研究重点。
本实验采取离体细胞ECV-304培养给药来进行试验验。相比单纯的细胞实验，整体动物实验往往易被复杂因素影响，难以判断是由药物的直接作用还是继发的机体自身反应，离体细胞培养则可排除复杂因素的干扰，并能够相对准确地研究药物对单一类型细胞的影响。
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