一、拟研究的问题：
顺铂是临床常用的化疗药物之一，可用于治疗卵巢癌、睾丸癌及头颈部肿瘤等，具有抗癌谱广、疗效确切等特点，但其副作用大，包括肾损害、胃肠道反应、骨髓抑制、耳毒性和肝毒性，其中以肾毒性最常见，其机制与氧化应激、炎症、基因损伤、以及细胞周期抑制等有关，有关顺铂对肾脏和内耳的损伤研究资料较多，有关顺铂肝毒性的研究资料很少[1]。化疗引起的药物性肝损伤影响治疗的连续性和患者的依从性，是限制抗肿瘤药物临床应用的一个重要因素[2]。甘草酸类制剂是临床常用的保肝药物，其中由江苏正大天晴制药股份有限公司自主研发生产的异甘草酸镁（magnesium isoglycyrrhizinate，MgIG）是第四代甘草酸制剂。所含有效成分是单一构型的alpha;-GL体，已有不少研究表明，在抗肿瘤化疗期间同时预防使用异甘草酸镁可防治药物性肝损伤，但对于MgIG与化疗药物联合应用对化疗药物的抗肿瘤药效的影响研究较少。本课题研究异甘草酸镁与顺铂合用对顺铂体外抑制肿瘤细胞生长的影响，初步评价异甘草酸镁对顺铂体外抗肿瘤药效的影响，为临床上顺铂化疗期间同时应用异甘草酸镁进行保肝治疗提供体外实验依据。
二、采用的研究手段：
1、体外细胞株的培养
采用含10%胎牛血清的1640培养基，5%CO2的恒温箱中传代培养肝癌HEPG2细胞。实验用细胞均处于对数生长期，台盼蓝拒染法表明细胞活力gt;95%。
2、MTT法检测MgIG与顺铂联合应用对体外培养的HEPG2细胞的影响
MgIG药物浓度设置：1.25、0.31、0.08g/L
顺铂药物浓度设置：1.110-3、2.810-4、6.810-5、1.710-5、4.310-6 mol/L
将处于对数生长期的肿瘤细胞制成单细胞悬液，调细胞浓度为1105/孔，接种于96孔板中，每孔200mu;L，于 37 ℃、5 %CO2的恒温培养箱中培养24 h后，每孔加200mu;L含药或无药培养液，设调零孔、空白对照组、各浓度联合用药组、顺铂组，每组至少设3个复孔。继续培养24h，48h，72h后，分别于不同的时间点，向每孔加入MTT(5g/L)20mu;L ，同等条件继续培养4 h。弃培养液，每孔加入150mu;L DMSO，充分震荡混匀，使结晶溶解，在酶联仪上测490 nm处吸光度(A值)，并计算细胞增殖抑制率(IR)。实验重复3遍。
3、半数抑制浓度IC50的计算
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