一、课题研究和解决的问题Terpentetriene是含有20个碳原子的二萜化合物，是研究抗肿瘤化合物Terpentecin生物合成途径中的关键前体物质。
通过文献调研，对Kitasatospora griseola菌株进行生物信息学和全基因组测序分析，结果表明该菌株含有与Terpentetriene生物合成相关的基因簇。
本课题旨在运用PCR和同源重组等技术对相关基因进行异源表达，通过发酵分离获得Terpentetriene化合物，为后续合成Terpentecin及其生物合成途径研究提供原料。
二、实验设计方案（1）生物信息学方法分析Kitasatospora griseola菌株，寻找合成Terpentetriene相关的基因簇；（2）PCR扩增目的基因片段以及将载体线性化，构建不同的重组载体；（3）通过同源重组技术将目的基因异源表达到大肠杆菌中；（4）对重组载体进行发酵实验，运用薄层色谱法和液相质谱联用技术检测产物；（5）大发酵实验分离目标化合物，通过核磁共振氢谱和核磁共振碳谱法确定化合物结构。
二、工作安排进展1月26日-2月29日：查阅文献，确定选题；3月01日-3月15日：确定实验方案，填写开题报告；3月16日-5月20日：完成相关实验内容，处理实验数据；5月21日-5月28日：完成毕业论文撰写；5月29日-6月10日：完成毕业论文审评，毕业论文答辩。
三、文献综述萜类化合物是大部分药用植物的有效成分，目前已知的萜类化合物结构超过8万种[1]。
萜类化合物以异戊二烯为结构单元，根据异戊二烯数目的不同，可以分为单萜、倍半萜、二萜、三萜、四萜和多萜。
从生物合成源来看，萜类化合物在生物体内主要有两条合成途径：一条是细胞质中的甲羟戊酸（mevalonic acid，MVA）途径，另一条是细胞质体中的2-甲基赤藓糖-4-磷酸（2-methyl erythritol 4-phosphate，MEP）途径[2]，动植物中主要存在的是MVA途径，MEP途径则主要是存在于原核生物和古生菌之中[3]。
焦磷酸异戊烯酯（isopentenyl pyrophosphate，IPP）和焦磷酸gamma;，gamma;-二甲基烯丙酯（gamma;，gamma;-dimethylallyl pyrophosphate，DMAPP）是生物体内的活性异戊二烯，都是MVA途径和MEP途径的中间产物，被认为是萜类成分在生物体内合成的前体物质，在各种酶的催化修饰下形成不同种类的萜类化合物[4]。
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