Lysobacter属菌株来源的几丁质酶基因及其表达分析文献综述

 2023-02-15 18:24:24

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、研究背景

几丁质(chitin)又称甲壳素,是N-乙酰氨基葡萄糖残基通过B-1,4糖苷键结合而成的直链多聚物。几丁质是大多数真菌细胞壁的重要组成成分,对真菌生长及其功能具有重要意义。几丁质酶可以降解真菌菌丝生长末端新合成的几丁质,使其顶端细胞壁变薄,引发气球状突起,最终导致原生质膜破裂,影响菌丝端部正常生长,抑制菌丝生长,从而达到抑制致病真菌生长的目的。几丁质也是节肢动物体内重要的结构性组分,同时,昆虫体内的几丁质代谢是处于几丁质分解酶和合成酶的动态平衡中,昆虫生长发育的各个时期都需要一定量几丁质来维持代谢平衡。高等植物和高等动物体内则不含几丁质,几丁质酶对高等动物、植物没有直接毒性,因此选择几丁质酶来破坏昆虫几丁质结构或几丁质代谢平衡,对于协同防治虫害具有极大的发展潜力。另外,几丁质是一种在地球上含量仅次于纤维素的天然高分子化合物,溶解性差,化学性质稳定,难以被动植物分解吸收。几丁质酶可以将几丁质降解为寡聚物,一方面便于动植物的吸收;另一方面,几丁质降解的寡聚壳聚糖具有水溶性、吸湿、抑菌等特性,已被应用于医药产品、保健食品、美容产品等方面。现有一重组载体构建完成的Lysobacter属菌株来源的几丁质酶基因,待将其转化入大肠杆菌BL21表达感受态中,诱导该几丁质酶基因表达,优化表达条件,纯化蛋白,对纯化蛋白进行酶学性质研究。

二、拟研究或解决的问题

1.诱导几丁质酶基因表达

2.优化表达的最佳条件

3.纯化表达产物

4.进行纯化蛋白的酶学性质研究。

三、研究手段

1 转化

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