茯苓佐剂多糖制备工艺研究文献综述

 2023-02-17 20:42:53

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

1 毕业设计(论文)内容和意义

1.1 研究内容

(1)筛选出影响茯苓总多糖和活性多糖提取和制备的影响因素

(2)茯苓总多糖最价制备工艺的优选、活性多糖分离和纯化工艺的建立

1.2 研究意义

疫苗佐剂可非特异性地与特异性免疫原性物质结合,诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应,提高机体保护能力,同时又能减少免疫物质的用量,降低疫苗的生产成本。近百年来,人类已开发了许多疫苗和菌苗。但传统疫苗多为全菌或全病毒制成,其免疫原性强。因此在之后很长的一段时间里,人类使用佐剂的领域主要集中在毒素、流感、疾病诊断。近年来,随着对免疫原的深入研究,以及生物化学、分子生物学技术的迅猛发展,抗原纯度越来越高,其免疫原性通常较弱,因此,非常需要用佐剂来增强其免疫原性或增强宿主对抗原的保护性应答,于是佐剂的研究广泛蓬勃发展起来。目前铝佐剂是世界上唯一被FDA批准可以用于人体上的佐剂,但铝佐剂也存在着注射局部会产生硬结、红斑;制备时批与批之间差异较大;只能增强Hi,而不能增强CMi;不能冻干这些缺点。福氏完全佐剂( FCA)是目前在实验动物中最常用的佐剂,但由于其自身缺点,如少数人使用后产生无菌脓结、批与批之间差异性大、有引发癌变的潜在危险、不稳定,时间一长就会分层等,并不能用于人类身上。理想的佐剂疫苗不仅能够增强免疫应答,更需要其作用于特定的免疫细胞,从而选择性地诱导机体形成针对特异抗原的有效免疫应答及减少副反应的发生。

中药多糖对免疫系统有重要的调节作用,它不仅能够激活B细胞、T细胞、自然杀伤细胞(NK)、巨噬细胞,还能够活化补体,促进细胞因子的生成,促进免疫器官的发育,对白细胞和单核巨噬细胞系统有免疫促进作用,且自身具有天然、低毒、无药物残留等优点,以及在使用安全性方面的优势,很有希望开成新型疫苗佐剂。

茯苓为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核,其味淡,性平,入心、脾、肾经,有利水消肿、健脾止泻和养心安神之功效,其现代药理实验研究证明,具有抑菌、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、增强机体免疫能力及降低血糖等功效;主要用于治疗小便不利、水肿、脾胃气虚、食少便塘、体倦乏力及心神不宁、心悸、失眠等症[1-3]。茯苓中的主要成分包括茯苓多糖、三萜类化合物(茯苓酸、茯苓素),其中茯苓多糖含量约占茯苓干燥菌核的93%。

本课题前期从中药茯苓中发现了具有良好的佐剂活性多糖。但其影响茯苓多糖作为疫苗佐剂的因素有很多:1)品种、来源不同,或用不同的提取方法获得的多糖,甚至多糖的不同分子量、立体结构、取代基、溶解度、黏度都会影响其生物活性,为多糖作为佐剂疫苗筛选带来了困难。2)多糖的纯度问题,其含量较低,后续的纯化及分离过程困难,很难获得高纯度的多糖,这为后续阐明多糖作为佐剂疫苗的机理增加了难度。3)难以建立质量标准,实验的重复性差,不符合药品的质量标准,难以进行课题申报。4)分子结构不明确,多糖不像小分子化合物,因其自身分子量大,结构复杂,研究技术的不成熟,不利于多糖的工业化生产。

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